Colombia fue el segundo seleccionado de la Confederación Sudamericana de Fútbol en clasificarse al mundial, tras Argentina. La selección de Brasil; consiguió su cupo al ser la organizadora del torneo. Colombia consiguió su cupo el 11 de octubre de 2013, tras empatar como local 3-3 con Chile en la penúltima fecha de las Eliminatorias de Conmebol.[2][3] El combinado colombiano finalizó la competición en el segundo puesto de la tabla, con treinta puntos, detrás de Argentina, y consiguió de esta forma su clasificación a la fase final de manera directa;[4] además, fue cabeza de serie del Sorteo de la Copa Mundial de Fútbol de 2014 tras finalizar cuarto (4.º) en el escalafón de selecciones de la FIFA del mes de octubre.[5]
El 4 de diciembre de 2013, se llevó a cabo el sorteo de la fase de grupos del campeonato en Costa de Sauípe, Salvador de Bahía, en Brasil, donde en dicho evento se determinó la ubicación de Colombia en el Grupo C junto a los equipos de Grecia, Japón y Costa de Marfil.[6] La convocatoria definitiva de los 23 jugadores que representan a Colombia en el mundial estuvo marcada por la ausencia de varios jugadores lesionados que fueron claves en las eliminatorias como Radamel Falcao García, Aldo Leão Ramírez, Luis Amaranto Perea y Edwin Valencia.[7] y la desafectación de Luis Fernando Muriel, lesiones que preocuparon, pero que no le quitaron el ímpetu a una selección revelación e histórica. José Pekerman vinculó a nuevos jugadores como Adrián Ramos, Víctor Ibarbo, Santiago Arias, Eder Álvarez Balanta, Alexander Mejía y Carlos Carbonero.
La participación de Colombia en el mundial tuvo su mejor inicio con una victoria ante Grecia por 3-0 con anotaciones de Pablo Armero, Teófilo Gutiérrez y James Rodríguez.[8] Posteriormente, llegó el triunfo ante Costa de Marfil por 2-1 y finalmente cerró la primera fase con la victoria ante Japón por 4-1, logrando 9 puntos para clasificarse a octavos de final como primero del grupo C.[9] En el último partido de la primera ronda ante Japón, el portero Faryd Mondragón ingresó al terreno de juego a los 85 minutos, obteniendo el récord del jugador más veterano en participar en la historia de los Mundiales de Fútbol.[10] En octavos de final Colombia enfrentó a Uruguay, logrando superarlo con dos goles de James Rodríguez.[11] Finalmente se encontró con la selección local en cuartos de final, perdiendo por 2-1. Con este resultado cerró la mejor participación de Colombia en un mundial de fútbol hasta la fecha, en la que ocupó el quinto puesto final, al sumar por primera vez cuatro victorias consecutivas y una diferencia positiva de 8 goles.[12] Es de destacar que con 6 goles anotados, el volante James Rodríguez ocupó el primer lugar en la tabla de goleadores del Mundial, consolidándose como ganador del Botín de Oro del Mundial.[13] Su primer gol en el partido contra Uruguay fue destacado como el mejor gol del campeonato por votación de los usuarios de la página de la FIFA.[14] Adicionalmente al finalizar el Mundial, la FIFA otorgó a Colombia el Premio al Juego Limpio del campeonato.[15]
Colombia selló su clasificación, con un partido de anticipación, al empatar a 3 goles con la selección de Chile en la fecha 17 de las eliminatorias sudamericanas.[16] Culminó su participación en el segundo lugar logrando así su mejor posición desde que el torneo se disputa con un formato de todos contra todos.
El centro de entrenamiento y hospedaje es el Centro de Formación de Atletas Presidente Laudo Natel propiedad del São Paulo FC área de 220 000 m2 (doscientos veinte mil metros cuadrados), y es considerada la más grande de Brasil, y está a 66.5 kilómetros del Aeropuerto Internacional de São Paulo-Guarulhos, facilidad para viajar a las ciudades sede de los partidos.
El 13 de mayo de 2014, a través del portal web oficial de la Federación Colombiana de Fútbol, se hizo pública la convocatoria preliminar de treinta jugadores de cara al campeonato, que posteriormente fue reducida a 23 jugadores.[17][18]
Nota: Datos correspondientes al 10 de junio de 2014, situación previa al inicio de la competición.[19] Las estadísticas de los jugadores fuera de la lista de 23, están hasta el día 16 de mayo.[20]
De estos treinta jugadores, en primera instancia, el 21 de mayo la Federación Colombiana de Fútbol hizo oficial, por medio de su presidente Luis Bedoya, que descartó a tres jugadores: el defensa Aquivaldo Mosquera y los mediocampistas Elkin Soto y Macnelly Torres.[21] Siete días después, José Pékerman confirmó que el volante Edwin Valencia tampoco iría al mundial debido a una lesión que lo aquejaba.[22] El 2 de junio se anunciaron los tres jugadores que restaban por descartar; de esta manera, el defensor Luis Amaranto Perea, y los delanteros Luis Muriel y Radamel Falcao García quedaron fuera de la lista de 23 jugadores para el torneo.[23] Finalmente el 8 de junio, el técnico Pékerman anunció que solicitaría el cambio de último momento del jugador Aldo Leão Ramírez, quien sufrió un esguince en la rodilla derecha, por Carlos Carbonero del argentino River Plate.[24]
8.vo lugar (junio de 2014)
José Pékerman
Francia 1998
Rusia 2018
Chile
Ecuador
Uruguay
Venezuela
Perú
Bolivia
Paraguay
4.º
Colombia
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50' 
Mark Clattenburg
Florian Meyer
Túnez
Javier Estrada Fernández
Senegal
Jordania
David Ospina
Portero.svg){kind=small}
Niza
Camilo Vargas
Faryd Mondragón
Cristian Zapata
Defensa
Milan
Pablo Armero
Mediocampista
Carlos Sánchez
James Rodríguez
Freddy Guarín
Alexander Mejía
Porto
Delantero
José Pekerman
Aldo Leão Ramírez 
Monarcas Morelia
Fluminense
Elkin Soto
Al-Shabab
Grecia
Costa de Marfil
Japón
Datos: Q15286740