HaeIII
HaeIII es una enzima de restricción de tipo II (EC 3.1.21.4)[1] producida por el microorganismo Haemophilus aegyptius que posee una diana de restricción en el ADN de cadena doble dependiente de una secuencia no metilada, palindrómica y no escalonada, sobre la cual su actividad catalítica hidrolasa genera extremos romos.
La diana de restricción puede representarse según este diagrama:
Sitio de reconocimiento | Resultado del corte |
5' GGCC 3' CCGG |
5' GG CC 3' CC GG |
Mecanismo de acción
La enzima rompe el ADN en la posición donde se encuentra la secuencia GGCC. El corte ocurre entre el segundo y el tercer nucleótido (G y C). Los fragmentos de ADNT se conocen como fragmentos de restricción. HaeIII corta ambas cadenas de ADN en la misma localización. La desnaturalización caliente ocurre a los 80 °C después de 20 minutos[2]
Referencias
- Griffiths, J .F. A. et al. (2002). Genética. McGraw-Hill Interamericana. ISBN 84-486-0368-0.