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MINFLUX es un método de visualización por fluorescencia que brinda una resolución espacial de 1nm utilizando un mínimo flujo de fotones. Esta es la máxima resolución que tiene sentido para un método óptico, ya que corresponde al tamaño de las fuentes de luz, en este caso, las moléculas fluorescentes. A diferencia de otros métodos de microscopía de superresolución, este método permite tener una alta resolución con un número de fotones muy bajo, evitando de esta forma el fotoblanqueo de los fluoróforos. Esta nueva metodología abre puertas para que este tipo de microscopía pueda competir con la microscopía electrónica, la cual brinda resolución espacial nanométrica pero impone condiciones muy desfavorables para observar organismos vivos. MINFLUX podría implementarse en un laboratorio convencional y el hecho de usar luz en vez de electrones energéticos, es conveniente para observar muestras biológicas. ​

Antecedentes

Con el fin de obtener mediante la microcopia óptica, imágenes con resolución superior a la impuesta por el limite de difracción, se han desarrollado varios métodos de microcopia de fluorescencia de super resolución. n₀

Los métodos dirigidos utilizan un haz de luz en forma de anillo, con un cero de interferencia en el centro, y utiliza algún mecanismo impulsado por luz para apagar la fluorescencia. Un ejemplo de este método es el STED, desarrollado por Stefan W. Hell y Jan Wichmann en 1994, el cual se basa en la emisión estimulada. Se ilumina el área donde se quiere apagar la fluorescencia con luz a una longitud de onda en la que se estimula a que el fluoroforo emita y se observa en otras longitudes de onda. Otro ejemplo el es el GSDIM, en el cual se aprovecha el tiempo que tarda el electrón en decaer del estado excitado, iluminando con una alta intensidad para mantener a los electrones en estado excitado evitando que emitan fluorescencia.

Por otro lado, se han desarrollado métodos estocásticos como STORM y PALM, que consisten en encender y apagar a las moléculas fluorescentes de forma que solo pocas moléculas se enciendan al mismo tiempo. De esta forma se toman imágenes y se realizan ajustes gaussianos.

Proceso

1D

LALALALA