Diferencia entre revisiones de «ADN complementario»
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El '''ADN complementario o ADNc''' es un [[ADN]] de cadena sencilla. Se sintetiza a partir de una hebra simple de [[ARNm]] maduro. Se suele utilizar para la [[clonación]] de genes propios de células [[eucariota]]s en células [[procariota]]s, debido a que, dada la naturaleza de su síntesis, carece de [[intrón|intrones]] |
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== Introducción == |
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El [[dogma central de la biología molecular]] dice que durante la síntesis de [[proteínas]], el ADN es transcrito en ARNm, que a su vez es traducido a proteínas.<ref>{{cita libro| autor = Lodish ''et al.'' | título = Biología celular y molecular | año = 2005 | editorial = Buenos Aires: Médica Panamericana | id = ISBN 950-06-1974-3}}</ref> Una diferencia entre ARNm eucariótico y procariótico es que el ARNm eucariótico puede contener [[intrón|intrones]], secuencias no codificantes que deben ser extraídas del ARNm antes de ser traducido a proteínas. El ARNm procariótico no tiene intrones, así que no sufre ningún proceso de corte y empalme (''splicing''). |
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A veces se quieren expresar genes eucariotas en células procariotas. Un método simple de hacerlo es insertar ADN eucariótico en un hospedador procariota, que transcribiría el ADN en ARNm y luego lo traduciría a proteínas. Pero como el ADN eucariota tiene intrones, y los procariotas carecen de mecanismos para eliminarlos, el proceso de extracción debe realizarse antes de introducir el ADN eucariota en el hospedador (además, debe ser metilado y hay que añadirle una región promotora procariota). Este ADN despojado de intrones es el ADN complementario, o ADNc. |
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== Síntesis == |
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Aunque existen varios métodos de síntesis, el ADNc es sintetizado casi siempre de ARNm maduro (sin secuencias intrónicas) utilizando la enzima [[Transcriptasa inversa|retrotranscriptasa]]. Esta enzima trabaja sobre un ''molde'' de cadena simple de ARN, creando el ADN complementario basado en la correspondencia de bases ARN ([[adenina|A]],[[uracilo|U]], [[guanina|G]], [[citosina|C]]) con las bases ADN complementarias ([[timina|T]], A, C, G). |
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Para la obtención de ADN eucariota cuyos intrones han sido eliminados: |
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# Una célula eucariota transcribe el ADN a ARNm. |
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# La misma célula procesa la nueva cadena de ARNm eliminando los intrones, y añadiendo una cola poli-A y un terminal GTP. |
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# Esta cadena de ARNm maduro se extrae de la célula. |
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# Se hibrida un oligoncleótido poli-T sobre la cola poli-A del molde de ARNm maduro, ya que la retrotranscriptasa necesita un cebador de doble cadena para comenzar a trabajar. |
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# Se añade la retrotranscriptasa, junto con las bases A, T, C y G. |
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La retrotranscriptasa va recorriendo la cadena de ARNm y sintetizando la cadena de ADN complementaria del molde de ARNm (ADNc). |
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== Aplicación == |
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El ADNc se utiliza a menudo en clonación de genes, en pruebas de genes o en la creación de librerías de ADNc. |
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== Referencias == |
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{{Listaref}} |
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pi co |
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[[Categoría:ADN]] |
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[[ar:دنا متمم]] |
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[[ca:ADN complementari]] |
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[[de:CDNA]] |
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[[el:CDNA]] |
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[[en:Complementary DNA]] |
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[[fa:دیانای مکمل]] |
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[[fi:CDNA]] |
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[[fr:ADN complémentaire]] |
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[[he:CDNA]] |
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[[id:DNA komplemen]] |
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[[it:DNA complementare]] |
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[[ja:相補的DNA]] |
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[[ms:CDNA]] |
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[[nl:CDNA]] |
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[[pl:CDNA]] |
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[[pt:DNA complementar]] |
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[[ru:КДНК]] |
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[[sv:CDNA]] |
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[[tr:Tamamlayıcı DNA]] |
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[[uk:Комплементарна ДНК]] |
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[[ur:متمم دنا]] |
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[[zh:互補DNA]] |